Sommario
Quali caratteristiche deve possedere un plasmide ricombinante?
Plasmide ricombinante creato per sopperire alla laboriosa selezione necessaria per pBR322, si caratterizza per: avere lunghezza di circa 2686 bp in cui è possibile inserire un frammento di DNA esogeno di massimo 10kb; sequenza ori, origine della replicazione che funziona in E. Coli (la stessa presente in pBR322);
Qual è il migliore vettore per geni Eucariotici?
I virus vengono frequentemente usati come vettori per i geni eucariotici e procariotici. Dal momento che per un virus infettare le cellule è un fatto naturale, i virus presentano un grande vantaggio rispetto ai plasmidi: non richiedono particolari artifici per essere indotti a penetrare nelle cellule ospiti.
Quali sono i virus usati come vettori di DNA?
Ma anche adenovirus o herpes virus hanno caratteristiche tali da essere utilizzati per il trasferimento di geni.
Come deve essere codificata la proteina d’interesse?
Il cDNA codificante la proteina d’interesse deve essere preventivamente clonato in un vettore d’espressione e poi trasferito (transfettato) nella cellula eucariotica, oppure all’interno del genoma di un virus che viene poi utilizzato per infettare le cellule. La trasfezione di cellule animali avviene tramite: elettroporazione;
Quali sono le proteine plasmatiche?
Come dicevamo, le proteine hanno anche una funzione di trasporto. Basti pensare alle proteine plasmatiche, come l’emoglobina, che trasporta l’ossigeno nel sangue, oppure l’albumina che rappresenta una sorta di camionista tutto fare impegnato a veicolare moltissime sostanze, inclusi alcuni ormoni, grassi e molti farmaci.
Qual è la funzione dei plasmidi?
Plasmidi Funzione dei plasmidi. Il genoma dei procarioti è costituito da un unico filamento circolare, non racchiuso da una membrana nucleare ma solamente raggrumato all’interno della cellula. La zona in cui è presente il genoma prende il nome di nucleoide. Oltre al genoma, sono spesso presenti, all’interno del liquido plasmatico, i plasmidi.
Quali sono i plasmidi più utilizzati nella tecnologia del DNA ricombinante?
I plasmidi storicamente più utilizzati nella tecnologia del DNA ricombinante sono pUC18 e pBR322. Il capostipite dei vettori plasmidici artificiali è pBR322. La sigla indica: p=plasmidio BR= ricercatori che crearono il plasmidio nel 1977(Bolivar e Rodriguez) 322=il numero del plasmide nella loro collezione di DNA.